Identifizierung und Charakterisierung des pathogenitätsrelevanten bZIP-Transkriptionsfaktors crb2p und Untersuchungen zur Rolle vakuolärer ATPasen im Infektionsprozess von Magnaporthe grisea
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Im Rahmen dieser Arbeit wurde der Einfluss vakuolärer ATPasen (V-ATPasen) auf das vegetative Wachstum und den Infektionsprozess von M. grisea untersucht. Im zweiten Teil konnten potentiell cAMP-regulierte Transkriptionsfaktoren in M. grisea identifiziert und der pathogenitätsrelevante Transkriptionsfaktor crb2p näher charakterisiert werden. In Inhibitorstudien konnte eine essentielle Rolle der V-ATPasen bei der Ansäuerung intrazellulärer Kompartimente, dem vegetativen Myzelwachstum, der Pathogenität, der Verwertung komplexer Kohlenstoffquellen und dem Wachstum von M. grisea auf Medien mit hohen Ca2+-Konzentrationen gezeigt werden. Deletionen V-ATPase-Untereinheiten-kodierender Gene waren für M. grisea lethal. Im zweiten Teil der Arbeit wurde ein pathogenitätsrelevanter bZIP-Transkriptionsfaktor, das putative cAMP responsive element binding (CREB) Protein crb2p identifiziert und charakterisiert. Eine crb2p-GFP-Fusion bestätigte die Lokalisierung des Proteins im Zellkern und zeigte, dass das Fusionsprotein in vegetativem Myzel, während der infektionsrelevanten Morphogenese und in planta exprimiert ist. Die crb2-Deletionsmutante besaß eine deutlich verringerte Virulenz auf Reispflanzen und war im in planta-Wachstum und dem vegetativen Myzelwachstum reduziert. crb2p reguliert die Genexpression reaktiver Sauerstoffspezies (ROS)-modulierender Enzyme in M. grisea. Die gestörte ROS-Regulation könnte ein Grund für die deutlich reduzierte Virulenz sein.