Vergleichende Untersuchung PCR-basierter Diagnostikverfahren für feline B-Zell-Lymphosarkome

1. Ziel der Arbeit war es, die bislang für diesen Zweck nicht eingesetzte High-Resolution Melting Analysis (HRM) für die Klonalitätsdiagnostik feliner B-Zell-Lymphosarkome zu etablieren. Weiterhin wurde die HRM mit den bereits etablierten PCR-basierten Klonalitätsverfahren (Kapillarelektrophorese und Polyacrylamidgelelektrophorese (PAGE)) verglichen. Der Fokus lag auf der Untersuchung hinsichtlich des Einsatzes in der Routinediagnostik. 2. Im Literaturteil wird ein Überblick über die Einteilung, Pathogenese und Diagnose feliner Lymphosarkome gegeben. Die verglichenen Untersuchungsmethoden (Kapillarelektrophorese und Polyacrylamidgelelektrophorese (PAGE)) werden unter Einbeziehung der molekularbiologischen Grundlagen (Aufbau und Rearrangement der B-Zell-Rezeptoren) und unter Berücksichtigung der aktuellen Literatur erläutert. 3. Die HRM wurde für die Verwendung in einem Klonalitätsverfahren von formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Material (FFPE) von BLymphozytenproliferationen etabliert, da FFPE-Material den Großteil des Probenmaterials in der Routinediagnostik darstellt. 4. 47 histologisch und immunhistologisch diagnostizierte B-Zell-Lymphosarkome und 31 reaktive Lymphozytenproliferationen wurden jeweils mit der HRM untersucht und mit der Polyacrylamidgelelektrophorese (PAGE) und der Kapillarelektrophorese verglichen. 5. Eine klonale Population wurde mittels der HRM in 11 von 47 Fällen, mittels der Kapillarelektrophorese und dem PAGE-Verfahren in 14 von 47 Fällen erkannt. 6. Histologisch diagnostizierte follikuläre Hyperplasien zeigten in der HRM reproduzierbar einen wellenförmigen Kurvenverlauf. 7. Die Interpretation der Ergebnisse der molekularbiologischen Untersuchungsverfahren muss im Kontext zu den klinischen, histologischen und immunhistologischen Befunden erfolgen, um das Risiko einer Fehldiagnose zu reduzieren.